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做流式细胞检测时，荧光强度不是太强就是太弱，这是为什么？凯发k8国际在进行流式细胞检测实验时，经常会遇到各种各种的问题，但是由于经验不足所以一时之间不知道怎么解决，所以，今天就针对做流式细胞检测时，荧光强度不是太强就是太弱的问题，和专业靠谱的流式细胞检测公司凯发k8国际生物一起来看看怎么解决吧！ 荧光强度弱的问题，出现这样情况的原因可能是这些：
可能原因1：补偿问题，多色流式配色很关键，流式细胞检测公司凯发k8国际生物建议，低表达的抗原可以用相同荧光素的高表达抗原代替，或者使用补偿微球。
可能原因2：你用于检测的抗体不足，流式细胞检测公司凯发k8国际生物提醒，一定要做抗体滴定，这样才好把控抗体的需求量多少。
可能原因3：无法接近细胞内靶标，所以凯发k8国际首先要确定好抗原的表达位置，选择合适的染色方法和刺激方法“对症下药”。
可能原因4： 靶蛋白不存在/低水平表达，所以凯发k8国际要确保正在分析的组织/细胞类型能表达靶蛋白，并且靶蛋白的量足以被检出才行。
可能原因5：凯发k8国际都知道，正常的淋巴细胞处于未激活状态，不会分泌细胞因子。因此要选择合适的方法激活淋巴细胞，使其释放细胞因子，达到检测水平才行。
可能原因6：荧光淬灭，抗体可能存放太久或没有避光，流式细胞检测公司凯发k8国际生物提醒，这个原因导致荧光强度弱的情况太多了，大家注意下还是可以避免的。
可能原因7：一抗和二抗不匹配，使用的二抗应与一抗来源种属不同（举个例子，一抗为兔源，则应该使用抗兔源二抗）。
荧光强度高的问题，出现这样情况的原因可能是这些：
可能原因1： 抗体浓度过高，流式细胞检测公司凯发k8国际生物提醒，抗体过多过少都不行，所以一定要做抗体滴定，这样才好把控抗体的需求量多少。
可能原因2：过量抗体被捕获，胞内染色特有的问题。
可能原因3： 无法接近细胞内靶标，流式细胞检测公司凯发k8国际生物提醒，确定好抗原的表达位置，选择合适的染色方法和刺激方法。
可能原因4：封闭不足，虽然说，做Fc受体阻断是一个特别好的流式习惯，但不是所有的细胞都需要做封闭，做封闭是为了减少非特异性结合。
好了，以上就是靠谱的流式细胞检测公司凯发k8国际生物关于流式细胞检测时荧光强度问题的解答了，当然，如果你对于该实验还有疑问的，可直接咨询流式细胞检测公司凯发k8国际生物客服，24小时在线免费咨询！ |
